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如何提取和研究血液DNA,RNA与蛋白

时间:2024-04-27 00:40:30 浏览量:64505

    正常trizol法提取rna浓度

    如何提取和研究血液DNA,RNA与蛋白?

    Trizol就是酚氯仿提取法的常用试剂

    Trizol中有酚,异硫氰酸胍和B-巯基乙醇。他们的作用都是使蛋白变性,使蛋白质与核酸解聚。加入氯仿,用来分相,实际上是加速有机相和水相的分层,当溶液pH在酸性的时候,DNA分子就会沉淀在酚与溶液的界面,就是白色层,只有RNA分子留在水相,但溶液pH不在酸性范围内,会使DNA溶解在水相,所以使用时按照说明书要求根据细胞数或培养器皿底面积适量加入Trizol。最后异丙醇沉淀,将水相中RNA提取出来。

    RNA的提取方法步骤及原理?

    RNA抽取一般使用Trizol法抽提: Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。 Trizol作用原理: 在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。 水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可从中间相沉淀得到DNA,加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。

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